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血清必須熱滅活嗎、對此BUNSEN帶您了解相關疑問!

更新時間:2023-08-16    點擊次數:3062

  血清必須熱滅活嗎、對此BUNSEN帶您了解相關疑問!


  血清熱滅活是許多細胞培養者探討的話題,許多科研的小伙伴拿到一瓶全新的血清,總會猶豫血清究竟要不要進行滅活處理、血清滅活要怎樣操作、在什么情況下要對血清進行滅活等等,關于這些疑問,BUNSEN本生技術小編今天就為大家做一個詳細的解答。

  一、什么是熱滅活?

  一般情況下,血清的熱滅活是在血清全部解凍后,置于56℃水浴中30分鐘進行處理。如果為了更好的保留血清的營養成分,減少熱滅活對血清的損傷,可以將血清置于40℃水浴中20分鐘進行熱滅活。

  二、血清為什么要熱滅活?

  很多人認為,血清熱滅活是為了消滅血清中的細菌、病毒等微生物,其實不然,一瓶合格的血清,在生產過程中,會嚴格把控血清中微生物的指標。一般情況下,用戶買到的血清,都是無菌的,可以在解凍后直接進行使用。

  對血清進行熱滅活處理,實際是為了使血清中的補體失活。補體是一種血清蛋白質,存在于人和脊椎動物血清及組織液中,不耐熱,活化后具有酶活性、可介導免疫應答和炎癥反應。可被抗原-抗體復合物或微生物所激活,導致病原微生物裂解或被吞噬。




  三、胎牛血清需要滅活嗎?

  胎牛血清是來自未分娩的胎牛,經心臟穿刺采血,后經其他步驟制備而來的。這個階段的血清中,未形成完整的補體系統,不會真正的干預免疫。胎牛血清中含有諸如生長因子、維生素、氨基酸等珍貴物質,將血清置于56℃水浴30分鐘,會導致這些珍貴的營養物質流失,對血清造成不小的傷害,所以一般情況下,胎牛血清不需要熱滅活處理。



  四、什么情況下需要熱滅活處理血清?

  當實驗涉及以下情況時,建議去除血清可能帶來的補體系統的干擾:

  1、誘導胚胎干細胞分化

  2、免疫學研究

  3、培養平滑肌細胞

  4、其他補體參與的細胞培養過程

  5、利用昆蟲細胞研究病毒感染

  因此,當涉及到一些對補體比較敏感的實驗,并且血清中補體濃度相對比較高,可能存在對實驗的影響時,需要考慮對血清進行熱滅活。

  五、血清熱滅活為什么會產生大量沉淀?

  1、血清滅活后出現的沉淀大多數是纖維蛋白析出,屬正?,F象。滅活過程中,多次搖晃血清,使血清受熱均勻可以降低蛋白的析出。

  2、當血清在未解凍狀態時,直接置于56℃水浴,滅活過程中血清局部受熱溫度過高,加熱時間過長就會產生膠狀沉淀,這樣的血清質量嚴重受損,是無法繼續正常使用的。

  總之,多數細胞培養中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩。我們建議,對于那些對血清進行滅活的用戶,需要通過試驗來證實其必要性,確定滅活的適當條件;在滅活過程中,需要嚴格認真監測,并選擇一個可重復的方案進行操作。

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